Produk

PIPA [piperazine-N,N′-bis(2-ethanesulfonic acid)] sering digunakan sebagai zat penyangga dalam biokimia.Ini adalah buffer asam etanesulfonat yang dikembangkan oleh Good et al.di tahun 1960-an.PIPES memiliki pKa dekat pH fisiologis yang membuatnya berguna dalam kerja kultur sel.Telah didokumentasikan untuk meminimalkan kehilangan lipid saat menyangga histologi glutaraldehida dalam jaringan tanaman dan hewan. Agen penyangga dengan pKa mendekati pH fisiologis.

Magainin peptida antimikroba 2 membentuk pori-pori dalam membran lipid dan menginduksi perembesan membran dari isi seluler.Meskipun permeasi ini mungkin penyebab utama aktivitas bakterisidalnya, mekanisme pembentukan pori masih kurang dipahami.Oleh karena itu kami menyelidiki secara rinci interaksi magainin 2 dengan membran lipid menggunakan vesikel unilamellar raksasa tunggal (GUVs).Pengikatan magainin 2 ke membran lipid GUV meningkatkan perubahan fraksional di area membran, δ, yang sebanding dengan konsentrasi permukaan magainin 2, X. Hal ini menunjukkan bahwa konstanta laju magainin 2 yang diinduksi dua -transisi keadaan dari keadaan utuh ke keadaan pori sangat meningkat dengan peningkatan δ.Ketegangan membran lipid setelah aspirasi GUV juga mengaktifkan pembentukan pori yang diinduksi magainin 2.Untuk mengungkap lokasi magainin 2, interaksi magainin 2 berlabel carboxyfluorescein (CF) (CF-magainin 2) dengan GUV tunggal yang mengandung probe fluoresen yang larut dalam air, AF647, diselidiki menggunakan mikroskop confocal.Dengan tidak adanya ketegangan akibat aspirasi, setelah interaksi magainin 2 intensitas fluoresensi pelek GUV akibat CF-magainin 2 meningkat dengan cepat ke nilai yang stabil, yang tetap konstan untuk waktu yang lama, dan pada 4-32 detik sebelumnya. awal kebocoran AF647 intensitas pelek mulai meningkat dengan cepat ke nilai stabil lainnya.Sebaliknya, dengan adanya ketegangan, tidak ada peningkatan intensitas pelek sesaat sebelum mulainya kebocoran yang teramati.Hasil ini menunjukkan bahwa magainin 2 tidak dapat mentranslokasi dari lapisan luar ke lapisan dalam sampai sesaat sebelum pembentukan pori.Berdasarkan hasil ini, kami menyimpulkan bahwa pori yang diinduksi magainin 2 adalah pori yang teraktivasi regang dan regangan lapisan tunggal bagian dalam adalah kekuatan pendorong utama pembentukan pori.