Produk

Akumulasi nuklir dari bentuk mutan protein nuklir Lamin-A, yang disebut Progerin (PG) atau Lamin AΔ50, terjadi pada Hutchinson-Gilford Progeria Syndrome (HGPS) atau Progeria, penyakit penuaan yang dipercepat.Salah satu gejala utama kelainan genetik ini adalah hilangnya lemak sub-kutan karena lipodistrofi yang dramatis. Kami secara stabil menginduksi ekspresi PG manusia dan GFP -Green Fluorescent Protein- sebagai kontrol dalam sel 3T3L1 menggunakan sistem lentiviral untuk mempelajari efek ekspresi PG dalam kapasitas diferensiasi garis sel ini, salah satu model adipogenik yang paling banyak digunakan.Proteomik kuantitatif (iTRAQ) dilakukan untuk mempelajari efek akumulasi PG.Beberapa protein termodulasi divalidasi dengan immunoblotting dan real-time PCR.Fungsi mitokondria dianalisis dengan pengukuran a) aktivitas basal mitokondria, b) produksi anion superoksida, dan c) efisiensi individu dari berbagai kompleks rantai pernapasan. Kami menemukan bahwa ekspresi berlebih PG oleh pengiriman gen lentivi ral mengarah ke a penurunan tingkat proliferasi dan defek pada kapasitas adipogenik jika dibandingkan dengan kontrol.Analisis proteomik kuantitatif menunjukkan 181 protein secara signifikan (p<0,05) termodulasi dalam preadiposit yang mengekspresikan PG.Fungsi mitokondria terganggu pada sel yang mengekspresikan PG.Secara khusus, kami telah mendeteksi peningkatan aktivitas kompleks I dan kelebihan produksi anion Superoksida.Inkubasi dengan agen pemulung Spesies Oksigen Reaktif (ROS) mendorong penurunan proteolisis autophagic seperti yang diungkapkan oleh rasio LC3-II / LC3-I. Ekspresi PG dalam sel 3T3L1 mendorong perubahan dalam beberapa Proses Biologis, termasuk struktur sitoskeleton, metabolisme lipid, kalsium regulasi, translasi, pelipatan protein, dan pembangkitan energi oleh mitokondria.Data kami memperkuat kontribusi akumulasi ROS pada fenotipe penuaan dini dan membangun hubungan antara disfungsi mitokondria dan hilangnya proteostasis di HGPS.