Produk

Beta-D-2'-deoxy-2'-fluoro-2'-C-methylcytidine (PSI-6130) adalah penghambat spesifik ampuh sintesis RNA virus hepatitis C (HCV) dalam sel replika Huh-7.Untuk menghambat HCV NS5B RNA polimerase, PSI-6130 harus difosforilasi menjadi bentuk 5'-trifosfat.Fosforilasi PSI-6130 dan penghambatan HCV NS5B diselidiki.Fosforilasi PSI-6130 oleh rekombinan manusia 2'-deoxycytidine kinase (dCK) dan uridin-cytidine kinase 1 (UCK-1) diukur dengan menggunakan reaksi spektrofotometri berpasangan.PSI-6130 terbukti menjadi substrat untuk dCK murni, dengan Km 81 microM dan kcat 0,007 s-1, tetapi bukan substrat untuk UCK-1.PSI-6130 monofosfat (PSI-6130-MP) secara efisien difosforilasi menjadi difosfat dan selanjutnya menjadi trifosfat oleh masing-masing UMP-CMP kinase manusia rekombinan dan nukleosida difosfat kinase.Penghambatan polimerase RNA HCV NS5B tipe liar dan bermutasi (S282T) dipelajari.Konstanta penghambatan kondisi tunak (Ki) untuk PSI-61 30 trifosfat (PSI-6130-TP) dengan enzim tipe liar adalah 4,3 mikroM.Hasil serupa diperoleh dengan 2'-C-methyladenosine triphosphate (Ki=1,5 microM) dan 2'-C-methylcytidine triphosphate (Ki=1,6 microM).NS5B dengan mutasi S282T, yang dikenal memberikan resistensi terhadap 2'-C-methyladenosine, dihambat oleh PSI-6130-TP seefisien tipe liar.Penggabungan PSI-6130-MP ke dalam RNA yang dikatalisis oleh NS5B RNA polimerase yang dimurnikan menghasilkan pemutusan rantai.