Produk

Serin/treonin protein fosfatase telah dideskripsikan pada banyak bakteri patogen sebagai enzim esensial yang terlibat dalam jalur transduksi sinyal yang bergantung pada fosforilasi dan sering dikaitkan dengan virulensi organisme ini.Inspeksi genom Mycoplasma synoviae mengungkapkan adanya gen (prpC) yang mengkode protein fosfatase diduga dari subfamili protein fosfatase 2C (PP2C).Di sini, kami melaporkan karakterisasi biokimia lengkap M. synoviae phosphatase (PrpC) dan peran khusus ion logam dalam hubungan struktur-fungsi enzim ini.Analisis sekuens asam amino PrpC mengungkapkan bahwa semua residu yang terlibat dalam pusat logam dinuklear dan residu pengkoordinasi ion logam ketiga diduga, yang dilestarikan dalam fosfatase PP2C, terdapat dalam PrpC.PrpC adalah protein monomer yang mampu mendefosforilasi substrat fosfo dengan ketergantungan ion Mn(2+).Analisis stabilitas termal menunjukkan stabilitas enzim pada temperatur ringan dan pengaruh ion Mn(2+) pada sifat ini.Analisis spektrometri massa menunjukkan bahwa tiga ion logam berikatan dengan PrpC, dua di antaranya dengan konstanta afinitas tinggi.Analisis mutasi dari residu pengkoordinasi logam ketiga diduga, Asp122 dan Arg164, mengungkapkan bahwa varian ini menunjukkan pengikatan ion mangan yang lebih lemah, dan bahwa kedua mutasi mempengaruhi aktivitas fosfatase PrpC.Menurut hasil ini, PrpC adalah anggota protein fosfatase yang bergantung pada logam dengan stabilitas yang lebih baik dalam bentuk holo dan dengan Asp122, kemungkinan terlibat dalam situs pengikatan logam ketiga, penting untuk aktivitas katalitik.