X-GAL CAS:7240-90-6 98% Bubuk Kristal Putih hingga Putih Pucat
Nomor katalog | XD90008 |
Nama Produk | X-Gal (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactopyranoside) |
CAS | 7240-90-6 |
Formula molekul | C14H15BrClNO6 |
Berat molekul | 408.63 |
Detail Penyimpanan | -2 hingga -6 °C |
Kode Tarif Harmonisasi | 29400000 |
Spesifikasi produk
Penampilan Solusi | Larutan bening, tidak berwarna hingga kuning muda (50mg/ml dalam DMF:MeOH, 1:1) |
Rotasi optik spesifik | -61,5 +/- 1 |
Penampilan | Bubuk kristal putih hingga putih pudar |
HPLC kemurnian | minimal 99% |
Kelarutan (5 % dalam DMF) | Larut (5% b/v,DMF) |
Air KF | maks 1% |
Pengujian (HPLC pada Basis Anhidrat) | min 98% b/b |
Penggunaan X-gal
X-gal (juga disingkat BCIG untuk 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside) adalah senyawa organik yang terdiri dari galaktosa yang dihubungkan dengan indol tersubstitusi.Senyawa ini disintesis oleh Jerome Horwitz dan kolaboratornya pada tahun 1964. Nama kimia formal sering disingkat menjadi frase yang kurang akurat tetapi juga kurang praktis seperti bromochloroindoxyl galactoside.X dari indoksil dapat menjadi sumber X dalam kontraksi X-gal.X-gal sering digunakan dalam biologi molekuler untuk menguji keberadaan enzim, β-galactosidase, menggantikan target biasanya, β-galactoside.Ini juga digunakan untuk mendeteksi aktivitas enzim ini dalam histokimia dan bakteriologi.X-gal adalah salah satu dari banyak glikosida dan ester indoksil yang menghasilkan senyawa biru yang tidak larut mirip dengan pewarna nila sebagai hasil hidrolisis yang dikatalisis oleh enzim.
X-gal adalah analog dari laktosa, dan karenanya dapat dihidrolisis oleh enzim β-galaktosidase yang memotong ikatan β-glikosidik dalam D-laktosa.X-gal, ketika dibelah oleh β-galactosidase, menghasilkan galaktosa dan 5-bromo-4-chloro-3-hydroxyindole - 1. Yang terakhir kemudian secara spontan dimerisasi dan dioksidasi menjadi 5,5'-dibromo-4,4'-dikloro -indigo - 2, produk yang sangat biru yang tidak larut.X-gal sendiri tidak berwarna, sehingga keberadaan produk berwarna biru dapat digunakan sebagai uji keberadaan β-galactosidase aktif.Ini juga memungkinkan bakteri β-galactosidase (disebut lacZ ) untuk digunakan sebagai reporter dalam berbagai aplikasi.
Dalam analisis dua-hibrid, β-galactosidase dapat digunakan sebagai reporter untuk mengidentifikasi protein yang berinteraksi satu sama lain.Dalam metode ini, pustaka genom dapat disaring untuk interaksi protein menggunakan sistem ragi atau bakteri.Di mana ada interaksi yang berhasil antara protein yang disaring, itu akan menghasilkan pengikatan domain aktivasi ke promotor.Jika promotor dikaitkan dengan gen lacZ, produksi β-galactosidase, yang menghasilkan pembentukan koloni berpigmen biru dengan adanya X-gal, akan menunjukkan interaksi yang berhasil antara protein.Teknik ini mungkin terbatas pada perpustakaan penyaringan dengan ukuran kurang dari sekitar 106. Pembelahan X-gal yang berhasil juga menciptakan bau busuk yang nyata karena penguapan indole.
Karena X-gal sendiri tidak berwarna, keberadaan produk berwarna biru dapat digunakan sebagai uji keberadaan β-galaktosidase aktif.
Identifikasi enzim aktif yang mudah ini memungkinkan gen untuk βgalactosidase (gen lacZ) digunakan sebagai gen reporter dalam berbagai aplikasi.