Produk

Meskipun etiologi degenerasi diskus intervertebralis kurang dipahami, salah satu pendekatan untuk mencegah proses ini mungkin dengan menghambat apoptosis.Dalam penelitian ini, efek anti-apoptosis carboxymethylated chitosan (CMCS) dalam sel nukleus pulposus (NP) diselidiki dengan tujuan untuk meningkatkan kelangsungan hidup sel diskus.Sel NP tikus diisolasi dan dikultur secara in vitro, dan hidrogen peroksida (H2O2) digunakan untuk membangun model apoptosis sel NP.Viabilitas sel dinilai dengan alat penghitung sel-8.Rasio sel apoptosis disurvei dengan analisis pewarnaan ganda annexin V-fluorescein isothiocyanate (FITC) dan propidium iodide (PI), dan morfologi diamati dengan pewarnaan Hoechst 33342.Potensi membran mitokondria sel NP dievaluasi dengan pewarnaan fluoresensi rhodamine 123.Reverse transcription (RT)‑quantitative polymerase chain reaction (qPCR) dilakukan untuk mengukur kadar mRNA dari inducible nitric oxide synthase (iNOS), caspase‑3, limfoma sel B (Bcl )‑2, kolagen tipe II dan aggrecan.Analisis western blot dilakukan untuk mendeteksi kadar protein iNOS dan Bcl‑2.Hasil pewarnaan annexin V‑FITC/PI dan Hoechst 33342 menunjukkan bahwa CMCS mampu mencegah sel NP dari apoptosis dengan cara yang bergantung pada dosis.Pewarnaan Rhodamine 123 mengklarifikasi bahwa CMCS mengurangi kerusakan potensial membran mitokondria pada sel NP yang diberi perlakuan H2O2.Pengurangan caspase‑3 dan peningkatan aktivitas Bcl‑2 terdeteksi pada sel NP yang diobati dengan CMCS dengan RT‑qPCR dan analisis western blot.CMCS juga mempromosikan proliferasi dan sekresi kolagen tipe II dan aggrecan dalam sel NP yang diobati dengan H2O2.CMCS diindikasikan efektif dalam mencegah kematian sel apoptosis in vitro, menunjukkan keuntungan potensial dari pendekatan terapeutik ini dalam mengatur degenerasi diskus.