Produk

Diferensiasi fibroblas orbital menjadi adiposit dewasa dan akumulasi jaringan adiposa berikutnya telah ditunjukkan dalam perkembangan orbitopati Graves (GO).Autophagy terlibat dalam adipogenesis, tetapi sedikit yang diketahui tentang peran autophagy dalam inisiasi dan perkembangan GO.Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki peran autophagy dalam patogenesis GO. Eksplan jaringan adiposa/konektif orbita dari pasien GO dan dari subjek normal, serta fibroblas orbita yang diisolasi, dianalisis.Adipogenesis diinduksi menggunakan media pembeda dengan atau tanpa hidrogen peroksida, dan autophagy dimanipulasi menggunakan bafilomycin A1 dan short hairpin RNA (shRNA) bertarget Atg5.Autofagosom diidentifikasi dengan mikroskop elektron.Ekspresi gen terkait autophagy dan faktor transkripsi terkait adipogenesis dianalisis dengan reaksi berantai transkripsi-polimerase terbalik waktu nyata dan / atau analisis Western blot.Akumulasi tetesan lipid diperiksa dengan pewarnaan Oil Red O. Vakuola autofagik lebih banyak terdapat pada sel GO daripada sel non-GO (p<0,05).Ekspresi gen terkait autophagy secara signifikan lebih tinggi pada jaringan dan sel GO dibandingkan pada rekan non-GO mereka.Interleukin-1β meningkatkan protein LC3-II, p62, dan Atg7 dalam sel GO.Akumulasi autophagosome ditunjukkan pada hari ke 4 adipogenesis dan menurun pada hari ke 10, bersamaan dengan pembentukan tetesan lipid.Ekspresi protein LC3 dan p62 meningkat dalam 48 jam diferensiasi dan berkurang secara bertahap dari hari ke 4 hingga 10. Perawatan Bafilomycin A1 dan Atg5 knockdown oleh shRNA menghambat akumulasi tetesan lipid dan menekan ekspresi penanda adipogenik. Autophagy meningkat pada jaringan dan sel GO dibandingkan dengan jaringan dan sel non-GO, menunjukkan bahwa autophagy berperan dalam patogenesis GO.Manipulasi autophagy mungkin menjadi target terapi untuk GO.