ONPG CAS:369-07-3 98,0% Min White To Off -Bubuk Putih
Nomor katalog | XD90006 |
CAS | 369-07-3 |
Nama Produk | ONPG(2-Nitrofenil-beta-D-galactopyranoside) |
Formula molekul | C12H15NO8 |
Berat molekul | 301.25 |
Detail Penyimpanan | 2 hingga 8 °C |
Kode Tarif Harmonisasi | 29400000 |
Spesifikasi produk
Kemurnian (HPLC) | Min.98,0% |
Penampilan | Serbuk putih hingga putih pucat |
Larutan(1% dalam Air) | Larutan bening, tidak berwarna hingga agak kuning |
Kadar air(Karl Fisher) | Maks.0,5% |
Rotasi optik spesifik [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0 °C hingga -73,0 °C |
Pembahasan uji ONPG (uji β-galaktosidase)
Pertanyaan yang sering muncul akhir-akhir ini: 1. Mengapa tes ONPG dapat digunakan untuk membedakan fermentasi laktosa yang tertunda?2. Mengapa standar nasional menyatakan perlu menggunakan besi trisakarida natrium klorida 3% (atau besi trisakarida) untuk tes ONPG?3. Untuk Vibrio parahaemolyticus, pada saat melakukan uji OPNG, mengapa harus ditambahkan toluene tetes demi tetes sesuai standar?Apa fungsinya?
Perusahaan kami telah meninjau banyak informasi, meringkasnya, dan membaginya dengan Anda di bawah ini:
Prinsip: Nama Cina ONPG adalah o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside.ONPG dapat dihidrolisis menjadi galaktosa dan o-nitrofenol (ONP) berwarna kuning oleh β-galactosidase, sehingga aktivitas β-galactosidase dapat dideteksi melalui perubahan warna media kultur.
Laktosa adalah gula yang perlu dideteksi oleh sebagian besar mikroorganisme.Metabolismenya membutuhkan dua enzim, satu permease sel, laktosa memasuki sel di bawah aksi permease;yang lainnya adalah β-galaktosidase, yang menghidrolisis laktosa menjadi galaktosa.Laktosa dan glukosa.β-Galaktosidase juga dapat langsung bekerja pada ONPG untuk menghidrolisisnya menjadi galaktosa dan o-nitrofenol (ONP) kuning.Ini dapat dilakukan dalam 24 jam, bahkan dengan fermentor tertunda laktosa.Oleh karena itu, dijelaskan hasil pengamatan kultur petik 1 dari agar miring dan inokulasi dalam lingkaran penuh pada suhu 36°C selama 1-3 jam dan 24 jam.Jika β-galactosidase diproduksi, ia akan menguning dalam 1-3 jam, jika tidak ada enzim tersebut, ia tidak akan berubah warna dalam 24 jam.
Menurut dua enzim di atas, mikroorganisme dapat dibagi ke dalam kategori berikut:
1 bakteri fermentasi laktosa (18-24 jam) dengan permease dan β-galactosidase P + G +;
2 Fermentor laktosa tertunda (memakan waktu lebih dari 24 jam) kurang permease tetapi memiliki galaktosidase: P-G+.
3 Fermentor non-laktosa yang kekurangan permease dan galaktosidase: P-G-.
Tes ONPG dapat digunakan untuk membedakan bakteri laktosa-lag-fermenting (P-G+) dari bakteri laktosa non-fermentasi (PG-), seperti:
1 Membedakan fermentor laktosa akhir (P-G+) dari fermentor non-laktosa (P-G-).
(a) Citrobacter (+) dan Salmonella arizonae (+) dari Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) dari Shigella sonnei (-).
Mengapa uji ONPG dilakukan menggunakan kultur semalam pada 3% natrium klorida ferric trisaccharide (trisakarida besi)?Perusahaan kami telah berkonsultasi dengan banyak informasi, tetapi tidak ada pernyataan yang jelas.Hanya di situs web FDA, tertulis bahwa "Inokulasi biakan untuk diuji pada agar miring tiga gula besi dan diinkubasi selama 18 jam pada suhu 37°C (atau suhu lain yang sesuai, jika diperlukan). Agar miring nutrisi (atau lainnya) mengandung 1,0 % laktosa juga dapat digunakan."berarti: bakteri uji diinokulasi pada media besi trisakarida dan dikultur pada suhu 37°C selama 18 jam.Media agar miring nutrisi (atau lainnya) yang mengandung 1% laktosa juga dapat diterima.Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa media besi trisakarida mengandung laktosa.Setelah pertumbuhan semalam, bakteri telah menghasilkan β-galaktosidase aktif yang baik.Menggunakan bakteri tersebut, ONPG dapat terurai oleh β-galactosidase lebih cepat.Fenomena eksperimental lebih cepat dan terwujud dengan lebih baik.Selain itu, penambahan toluena tetes demi tetes dan penangas air selama 5 menit semuanya untuk melepaskan β-galactosidase sepenuhnya.