Produk

Salah satu faktor yang mencegah penerapan klinis obat regeneratif pada penyakit kartilago degeneratif adalah sumber sel yang cocok.Chondrocytes, satu-satunya jenis sel tulang rawan, tumbuh secara in vitro dalam kondisi kultur untuk memperluas jumlah sel kehilangan fenotipnya bersama dengan kemampuan untuk menghasilkan jaringan tulang rawan hialin.Dalam penelitian ini kami menentukan bahwa sistem kultur tiga dimensi (3D) bebas faktor serum dan faktor pertumbuhan mengembalikan kemampuan kondrosit yang dilewati untuk membentuk jaringan tulang rawan in vitro, sebuah proses yang melibatkan sox9. memungkinkan perluasan jumlah sel (P2) dan dikultur dengan kepadatan tinggi pada membran berlapis kolagen tipe II 3D dalam media konten glukosa tinggi yang dilengkapi dengan insulin dan deksametason (SF3D).Sel-sel dikarakterisasi setelah ekspansi monolayer dan mengikuti kultur 3D dengan flow cytometry, ekspresi gen, dan histologi.Perubahan awal dalam jalur transduksi pensinyalan selama redifferensiasi ion ditandai. Sel P2 menunjukkan profil antigen seperti progenitor 99% CD44(+) dan 40% CD105(+) dan profil ekspresi gen yang menunjukkan sel antar zona.P2 dalam SF3D mengekspresikan gen khondrogenik dan mengakumulasi matriks ekstraseluler.Downregulating insulin receptor (IR) dengan HNMPA-(AM3) atau jalur PI-3/AKT kinase (diaktifkan oleh pengobatan insulin) dengan sintesis kolagen yang dihambat Wortmannin.HNMPA-(AM3) mengurangi ekspresi gen Col2, Col11, dan IR serta Sox6 dan -9.Analisis ko-imunopresipitasi dan kromatin imunopresipitasi sel yang diobati dengan HNMPA-(AM3) menunjukkan pengikatan koaktivator Sox6 dan Med12 dengan Sox9 tetapi mengurangi pengikatan Sox9-Col2a1. Kami menjelaskan metode kultur baru yang memungkinkan peningkatan jumlah kondrosit dan mempromosikan pembentukan jaringan tulang rawan seperti hialin sebagian dengan pengikatan Sox9-Col2a1 yang dimediasi insulin.Kesesuaian jaringan yang dihasilkan melalui pendekatan ini untuk digunakan dalam perbaikan sendi perlu diperiksa secara in vivo.