Produk

1. Metode profiling metabolit adalah alat penting untuk pengukuran kumpulan metabolit dalam sistem biologis.Sementara sebagian besar metode pembuatan profil metabolit melaporkan intensitas relatif atau bergantung pada beberapa standar internal yang mewakili semua metabolit, persyaratan utama untuk deskripsi kuantitatif kumpulan metabolit dalam sel dan cairan biologis adalah penentuan konsentrasi mutlak.Kami melaporkan di sini metode kromatografi gas/spektrometri massa tandem (GC/MS/MS) dengan throughput tinggi dan sensitif yang memungkinkan kuantifikasi absolut dari semua metabolit yang terdeteksi.Metode ini didasarkan pada derivatisasi dan kuantifikasi metil kloroformat dengan spiking sampel dengan standar metabolit yang diderivatisasi secara terpisah dengan reagen derivatisasi deuterasi.Ionisasi tumbukan elektron tradisional diganti dengan ionisasi kimiawi positif karena ionisasi kimiawi positif mempertahankan ion molekuler dan fragmen berbobot molekul tinggi lainnya dalam jumlah yang jauh lebih besar.Ini membuatnya lebih mudah untuk memilih transisi MS/MS yang unik di antara banyak metabolit coeluting.Saat ini, metode GC/MS/MS baru terdiri dari 67 metabolit primer umum yang sebagian besar termasuk dalam kelompok asam organik amino dan nonamino.Kami menunjukkan penerapan metode pada sampel urin dan serum.Metode ini merupakan peningkatan yang signifikan dari metodologi saat ini untuk pembuatan profil metabolit GC/MS kuantitatif dari asam amino dan asam organik nonamino.

2.24S-Hydroxycholesterol (24OHC) dan 27-hydroxycholesterol (27OHC) adalah dua oxysterol yang mirip secara struktural dari asal yang berbeda - yang pertama hampir secara eksklusif terbentuk di otak dan yang terakhir terbentuk pada tingkat yang lebih rendah di otak daripada di sebagian besar organ lainnya.HIPOTESIS YANG AKAN DIUJI: Kerusakan saraf dan/atau demielinasi menyebabkan peningkatan fluks 24OHC dari otak ke cairan serebrospinal (CSF), sedangkan defek sawar darah-otak menyebabkan peningkatan fluks 27OHC dari sirkulasi ke CSF. Massa pengenceran isotop spektrometri digunakan untuk menguji dua oxysterol dalam CSF dan plasma dari lebih dari 250 pasien dengan penyakit neurologis dan geriatri yang berbeda. Level CSF dari dua oxysterol jauh lebih dipengaruhi oleh penyakit yang berbeda daripada level plasma.Pasien dengan penyakit demielinasi aktif mengalami peningkatan kadar 24OHC dalam CSF dengan rasio 24OHC/27OHC yang relatif tinggi.Pasien dengan meningitis pada umumnya memiliki kadar kedua steroid yang tinggi dengan rasio 24OHC/27OHC yang rendah.Pasien dengan penyakit Alzheimer mengalami sedikit peningkatan kadar 24OHC di CSF dengan peningkatan 27OHC yang lebih sedikit.Pasien dengan multiple sclerosis memiliki kecenderungan untuk memiliki kadar 24OHC yang lebih tinggi selama periode aktif dengan rasio 24OHC/27OHC yang tinggi. Pengukuran dua oxysterol dalam CSF dan plasma dapat menambah secara signifikan metode biokimia yang ada untuk evaluasi penyakit saraf.