Produk

Kami mengembangkan sistem pengiriman RNA (siRNA) kecil yang mengganggu menggunakan kompleks terner dengan polietilenimina (PEI) dan asam γ-poliglutamat (γ-PGA), yang menunjukkan efek pembungkaman dan tidak ada sitotoksisitas.Kompleks biner siRNA dengan PEI berukuran sekitar 73-102 nm dalam ukuran partikel dan 45-52 mV dalam potensial ζ.Efek pembungkaman kompleks siRNA / PEI meningkat dengan peningkatan PEI, dan kompleks siRNA / PEI dengan rasio muatan lebih besar dari 16 menunjukkan knockdown luciferase yang signifikan dalam garis sel karsinoma usus besar tikus yang secara teratur mengekspresikan luciferase (sel Colon26 / Luc).Namun, sitotoksisitas yang kuat dan aglutinasi darah diamati pada kompleks siRNA/Lipofectamine dan kompleks siRNA/PEI16.Pengisian kompleks kationik dengan senyawa anionik dilaporkan menjadi metode yang menjanjikan untuk mengatasi toksisitas ini.Oleh karena itu kami menyiapkan kompleks terner siRNA dengan PEI (rasio muatan 16) dengan penambahan γ-PGA untuk mengurangi sitotoksisitas dan menghasilkan siRNA.Seperti yang diharapkan, sitotoksisitas kompleks terner menurun dengan peningkatan konten γ-PGA, yang menurunkan potensi ζ kompleks.Efek pembungkaman yang kuat sebanding dengan kompleks siRNA/Lipofectamine ditemukan di kompleks terner termasuk γ-PGA dengan muatan permukaan anionik.Penggabungan kompleks terner yang tinggi ke dalam sel Colon26 / Luc dikonfirmasi dengan mikroskop fluoresensi.Setelah mencapai knockdown dari gen yang ditransfusikan secara eksogen, kemampuan kompleks untuk memediasi knockdown dari gen rumah tangga endogen, gliseraldehida 3-fosfat dehidrogenase (GAPDH), dinilai dalam sel B16-F10.Kompleks terner (kompleks siRNA / PEI16 / γ-PGA12) menunjukkan efek knockdown GAPDH yang signifikan.Jadi, kami mengembangkan sistem pengiriman siRNA yang berguna.