Produk

Hiperpermeabilitas vaskular berkontribusi terhadap morbiditas dalam peradangan.Metodologi saat ini untuk penilaian permeabilitas in vivo berdasarkan ekstravasasi albumin yang terikat Evans Blue (EB) rumit dan seringkali kurang sensitif.Kami mengembangkan metodologi fluoresensi inframerah (IRF) baru untuk pengukuran ekstravasasi EB-albumin untuk mengukur permeabilitas vaskular dalam model murine.Permeabilitas vaskular yang diinduksi oleh endotoksemia diperiksa untuk semua organ padat, otak, kulit dan peritoneum oleh IRF dan pengukuran EB berbasis absorbansi tradisional dalam ekstrak jaringan.IRF organ meningkat secara linier dengan peningkatan konsentrasi EB intravena (2,5-25 mg/kg).IRF jaringan lebih sensitif untuk akumulasi EB dibandingkan dengan metode berbasis absorbansi.Oleh karena itu, perbedaan dalam permeabilitas vaskular dan akumulasi EB organ antara tikus yang diberi perlakuan lipopolisakarida dan yang diberi saline seringkali signifikan ketika dianalisis dengan deteksi berbasis IRF tetapi tidak dengan deteksi berbasis absorbansi.EB terdeteksi pada semua 353 organ yang dianalisis dengan IRF tetapi hanya pada 67% (239/353) organ yang dianalisis dengan metodologi berbasis absorbansi, yang menunjukkan peningkatan sensitivitas deteksi EB pada organ dengan IRF.Sebaliknya, EB dalam plasma setelah pemberian EB mudah diukur dengan kedua metode dengan korelasi tinggi antara kedua metode (n=116, r2=0,86).Kuantisasi perbedaan EB-IRF spesifik organ karena endotoksin optimal ketika IRF dibandingkan antara tikus yang cocok untuk berat, jenis kelamin, dan usia, dan dengan koreksi yang sesuai untuk berat organ dan konsentrasi plasma EB.Khususnya, metodologi EB-IRF membuat organ tetap utuh untuk histopatologi selanjutnya.Singkatnya, EB-IRF adalah metode baru, sangat sensitif, cepat, dan nyaman untuk kuantifikasi relatif EB dalam organ pengobatan yang utuh versus tikus kontrol.