Produk

CTP: phosphocholine cytidylyltransferase α (CCTα) adalah enzim nuklir yang mengkatalisasi langkah pembatas laju dalam jalur CDP-choline untuk sintesis fosfatidilkolin (PC).Aktivasi lipid CCTα menghasilkan translokasi ke selubung nukleus dan perluasan jaringan membran intranuklear yang disebut retikulum nukleoplasma (NR) melalui mekanisme yang melibatkan deformasi membran.Lamin nuklir juga diperlukan untuk stabilitas dan proliferasi NR, tetapi apakah struktur unik ini, atau lamina nuklir secara umum, diperlukan untuk sintesis PC tidak diketahui.Untuk menguji hubungan ini, lamina nuklir habis oleh RNAi atau terganggu oleh ekspresi sindrom progeria Hutchinson-Gilford (HGPS) mutan lamin A (progerin), dan efek pada CCTα dan metabolisme kolin dianalisis.pembungkaman lamin A / C atau lamin B1 yang dimediasi siRNA dalam sel CHO untuk mengurangi NR tidak berpengaruh pada sintesis PC, sementara knockdown ganda secara non-spesifik menghambat jalur.Mengonfirmasi peran kecilnya dalam sintesis PC, hanya 10% dari kolin/etanolamin fosfotransferase yang diekspresikan secara berlebihan terdeteksi di NR.Dalam sel CHO, CCTα bersifat nukleoplasma dan terlokalisasi bersama dengan GFP-progerin dalam lipatan dan invaginasi nuklir;namun, fibroblas HGPS menunjukkan distribusi CCTα yang tidak normal dalam sitoplasma dan amplop nuklir yang disertai dengan pengurangan 2 kali lipat dalam sintesis PC.Terlepas dari lokalisasi yang berubah, percobaan pelabelan kolin menunjukkan bahwa aktivitas CCT tidak terpengaruh, dan penghambatan sintesis PC dilacak untuk mengurangi aktivitas transporter kolin yang peka terhadap hemikolinium.Kami menyimpulkan bahwa CCTα dan lamin secara khusus bekerja sama untuk membentuk NR, tetapi keseluruhan struktur selubung nuklir memiliki dampak minimal pada aktivitas CCT dan sintesis PC.