Produk

Efek deterjen pada aktivitas atpase P-glikoprotein: perbedaan dalam gangguan aktivitas yang bergantung pada basal dan verapamil.

P-glikoprotein (P-gp), sebuah glikoprotein membran plasma yang terkait dengan fenotipe resistensi multiobat, bertanggung jawab untuk penghabisan tergantung ATP dari berbagai obat amfifilik.Dengan menggunakan vesikel membran yang dibuat dari garis sel yang resistan terhadap berbagai obat DC-3F/ADX, kami mempelajari gangguan basal (yaitu dengan tidak adanya obat) dan aktivitas P-gp ATPase yang bergantung pada verapamil yang diinduksi oleh berbagai deterjen, pada non-pelarut, serta pada pelarutan, konsentrasi.Pelarutan membran progresif dengan peningkatan konsentrasi deterjen dipantau dengan percobaan hamburan cahaya dan sentrifugasi.Untuk konsentrasi detergen non-pelarut, semua detergen yang diuji kecuali DOC menginduksi penghambatan parsial aktivitas P-gp ATPase, yang tidak berkorelasi dengan jumlah berbagai detergen yang diuji yang tergabung dalam membran.Analisis aktivasi P-gp yang diinduksi verapamil mengungkapkan bahwa aktivitas ATPase P-gp dimodulasi secara berbeda oleh berbagai deterjen pada konsentrasi non-pelarut.Dengan demikian, interaksi spesifik antara P-gp dan deterjen lebih mungkin terjadi daripada gangguan membran global.Setelah dilarutkan oleh berbagai detergen yang diuji, aktivitas ATPase P-gp basal hampir sepenuhnya dihambat, kecuali dengan adanya CHAPS yang mampu mempertahankan aktivitas ini pada tingkat yang sebanding dengan yang diukur dalam membran asli.Namun, aktivasi P-gp ATPase yang diinduksi verapamil hilang selama pelarutan P-gp oleh CHAPS, tetapi pulih setelah pengenceran CHAPS di bawah konsentrasi misel kritisnya.Pengamatan ini menunjukkan interaksi spesifik antara molekul P-gp dan CHAPS dalam misel campuran.Secara keseluruhan, data kami membuktikan interaksi spesifik P-gp/deterjen konsisten dengan lokasi situs transportasi obat pada domain transmembran P-gp.